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实验室日常的一天,从离心开始

2022/6/8 11:32:01      点击:

实验室日常的一天,从离心开始

今天是食品检验科的病毒检测,下面介绍是的是软质水果和生食蔬菜的诺如病毒的提取。



软质水果和生食蔬菜的病毒提取步骤:


1、将25g软质水果或生食蔬菜切成约2.5cmX2.5cmX2.5cm的小块(如水果或蔬菜小于该体积,可不切)。





2、将样品小块移至带有400 mL网状过滤袋的样品袋,加入40 mLTGBE溶液(软质水果样品,需加入30U A.niger果胶酶,或1140U A.aculeatus果胶酶),加入10μL过程控制病毒。

3、室温,60次/min,振荡20 min。酸性软质水果需在振荡过程中,每隔10 min检测pH,如pH低于9.0时,使用1 mol/L NaOH调pH至9.5,每调整一次pH,延长振荡时间10 min。

4、将振荡液转移至离心管,如体枳较大,可使用2根离心管。高速冷冻离心机10000 r/min,4℃,离心30 min。取上清至干净试管或三角瓶,用1 mol/L HCl调pH至7.0。

5、加入0.25倍体积 5XPEG/NaCl溶液,使终溶液浓度为100 g/L PEG,0.3 mol/L NaCl。60 s摇匀,4℃,60 次/min,振荡60 min。10000 r/min,4℃,离心 30 min,弃上清。高速冷冻离心机10000 r/min,4℃,离心5 min,紧实沉淀,弃上清。

6、500 μL PBS悬浮沉淀。如食品样品为生食蔬菜,可直接将悬浮液转移至干净试管,测定并记录悬浮液毫升数,用于后续RNA提取。

如食品样品为软质水果,将悬浮液转移至耐氯仿试管中。加入500 μL氯仿/丁醇混合液,涡旋混匀,室温静置5 min。高速冷冻离心机10000 r/min,4℃,离心 15 min,将液相部分仔细转移至干净试管,测定并记录悬浮液毫升数,用于后续RNA提取。


按照常规的提取软质水果和生食蔬菜的病毒,整个实验过程需要,至少使用离心机 3 次以上……


常用的离心机长什么样给大家展示一下



可选择多款试用于0.5ml至100ml的角转子,满足不同试管的离心需求。且角转子带生物安全密封功能,防止病毒污染,安全可靠。


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