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胶原蛋白的提取工艺研究

2017/7/24 15:13:46      点击:

一、胶原蛋白对美容护肤的功效

  胶原蛋白是修复受损组织的重要原料物质。当真皮层的胶原蛋白被氧化、断裂后,对表皮的支撑作用就消失了,因此造成不均一的塌陷,这样皱纹就产生了。现在,小分子胶原蛋白作为一种有效的化妆品原料,能做到滋润肌肤,赋予其平滑感觉,因此被称为“骨中之骨,肤中之肤,肉中之肉”,可以说是真皮层强有力的后盾,其对皮肤的作用不言而喻。胶原蛋白加入护肤类化妆品中,与其它原料配伍性佳,对受损肌肤有效好的修复作用。口服纯胶原蛋白1个月后,肌肤变得细腻、润滑、细小皱纹得到很好的舒展,肤色有所增白。


二、主要仪器与试剂

1.主要仪器

控温磁力搅拌器,高速组织捣碎机,酸度计(或pH试纸),高速冷冻离心机。

2.试剂

猪皮或肌腱,胃蛋白酶,醋酸,硫酸铜,硫酸钾,氢氧化钠,硫酸,硼酸,盐酸。

三、实验步骤

安全预防:醋酸具有刺激性气味,需要在通风橱中进行。

1.原料前处理

将新鲜猪皮或肌腱去脂肪、筋膜后,切成5 mm以下的薄片,越少越有利于提取胶原蛋白。然后除血,脱脂,再用蒸馏水漂洗干净,晾干备用。前处理时必须充分去除脂肪组织,胶原中一旦有脂质混入,无论是进行中性,还是酸性沉淀溶解都是不能去除的,最后只能得到乳浊状的胶原溶液。

2.胶原蛋白的提取

将上述预处理好的猪皮或肌腱称重后放入三角烧瓶中,分别加入一定量的酶和一定浓度的乙酸溶液进行水解,控制温度4 ℃左右缓慢搅拌3 d,然后用高速冷冻离心机以4000 r·min-1离心,取上清溶液,即可得粗提胶原蛋白溶液。

3.胶原蛋白提纯

-在粗提胶原蛋白溶液缓慢加入6 mol·L1氢氧化钠溶液调节pH值到7,冷冻离心除掉沉

淀物,在剩余的溶液中加入氯化钠固体研细粉末,缓慢搅拌,4 ℃静置过夜保存。离心取沉淀,用稀醋酸再次溶解,将溶解液装入透析袋中,用质量分数分别为0.1%的乙酸溶液透析1 d,再用蒸馏水透析,最后得到的是纯度较高的胶原蛋白水溶液。

4.蛋白质含量的测定

凯氏定氮法。胶原蛋白是修复受损组织的重要原料物质。